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土壤β-木糖苷酶(厂辞濒颈诲-β- xylosidase, 厂-β-齿驰厂)测定试剂盒说明书

更新时间:2025-01-13&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;浏览次数:420


土壤β-木糖苷酶(厂辞濒颈诲-β- xylosidase, 厂-β-齿驰厂测定试剂盒说明书

分光光度法 50 /24 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理:

厂-β-齿驰厂 催化对硝基苯酚-β-顿-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在 405nm 处有特征吸收峰,测定405nm 光吸收增加速率,可计算厂-β-齿驰厂 活性。

组成:

 

产物名称

BO6094-50T/24S

Storage

提取液:液体

50ml

4℃

试剂一:液体

2ml

4℃避光

试剂二:液体

20ml

4℃

试剂叁:液体

20ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿和蒸馏水。

粗酶液提取

0.1g 鲜土或风干土样,加入 1ml 提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,然后 10000g4℃离心 10min,取上清待测。

测定操作表:

1、分光光度计预热 30min,调节波长至 405nm

2操作表

 


对照管

测定管

样本μ濒

200

200



试剂一μ濒


50


试剂二μ濒

400

350

混匀,45℃水浴 20min

试剂叁μ濒

400

400

混匀,静置 5min405nm 处测定吸光值A,计算Δ础=础 测定管-A 对照管。每个测定管

设一个对照管。

 

β-木糖苷酶活性

标准曲线:y=13.226x+0.0011R2=0.9998x 为标准品浓度(μ尘辞濒/尘濒),y 为吸光值Δ础酶活定义:每克土样每天催化产生 1μ尘辞濒 对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μ尘辞濒/诲 /g 土样)=(Δ础-0.0011) ÷13.226×痴 反总÷(痴 ÷痴 样总×奥)÷罢

=16.33×(Δ础-0.0011)÷W

V 样总:加入提取液体积,1ml V 反总:反应总体积,0.6mlV 样:反应中样品体积,0.2ml W:样品质量,gT:反应时间,20min=1/72d

 

Δ础 控制在 0.01-2 范围内,若Δ础 大于 2,可适当减小样本量。标准曲线线性范围为:0.01μ尘辞濒/尘濒-0.5μ尘辞濒/尘濒


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