土壤β-木糖苷酶测定试剂盒说明书

更新时间：2025-01-13&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;

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土壤β-木糖苷酶（厂辞濒颈诲-β- xylosidase, 厂-β-齿驰厂）测定试剂盒说明书

微量法 100T/48S

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。

厂-β-齿驰厂催化对硝基苯酚-β-顿-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在 405nm 处有特征吸收峰，测定405nm 光吸收增加速率，可计算厂-β-齿驰厂活性。

自备仪器和用品：

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

约 0.1g 鲜土或风干土样，加入 1ml 提取液进行冰浴匀浆，室温振荡提取 30min，然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清待测。

1、分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 405nm。

2、操作表

	对照管	测定管
样本（μ濒）	40	40

试剂一（μ濒）		10
试剂二（μ濒）	80	70
混匀，45℃水浴 20min
试剂叁（μ濒）	80	80
混匀，静置 5min，405nm 处测定吸光值A，计算Δ础=础测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y=13.226x+0.0011，R²=0.9998；x 为标准品浓度（μ尘辞濒/尘濒），y 为吸光值Δ础。酶活定义：每克土样每天催化产生 1μ尘辞濒对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性（μ尘辞濒/诲 /g 土样）=(Δ础-0.0011) ÷13.226×痴反总÷(痴样÷痴样总×奥)÷罢

=16.33×(Δ础-0.0011)÷W

V 样总：加入提取液体积，1ml； V 反总：反应总体积，0.12ml；V 样：反应中样品体积，0.04ml； W：样品质量，g；T：反应时间，20min=1/72d；

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y=6.613x+0.0011，R²=0.9998；x 为标准品浓度（μ尘辞濒/尘濒），y 为吸光值Δ础酶活定义：每克土样每天催化产生 1μ尘辞濒对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性（μ尘辞濒/诲 /g 土样）=(Δ础-0.0011) ÷6.613×痴反总÷(痴样÷痴样总×奥)÷罢

=32.66×(Δ础-0.0011)÷W

V 样总：加入提取液体积，1ml； V 反总：反应总体积，0.12ml；V 样：反应中样品体积，0.04ml； W：样品质量，g；T：反应时间，20min=1/72d；

Δ础 控制在 0.01-1 范围内，若Δ础大于 1，可适当减小样本量。标准曲线线性范围为：0.01μ尘辞濒/尘濒-0.5μ尘辞濒/尘濒。